GRP40介导游离脂肪酸对葡萄糖刺激的胰岛素分泌和β细胞内钙离子浓度的变化

目的 探讨G蛋白耦联受体40(GPR40)是否介导游离脂肪酸(FFAs)短期、长期作用对小鼠胰岛NIT-1 β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)及胞内钙离子浓度的影响.方法 利用siRNA技术抑制GPR40在NIT-1细胞的表达,ELISA法检测棕榈酸、油酸短期(2 h)、长期(48 h)干预对NIT-1细胞GSIS的影响,激光共聚焦显微镜下观察GSIS过程中细胞内钙离子的变化.结果 FFAs短期干预促进空转染组、对照siRNA转染组GSIS水平(P＜0.01),而对GPR40 siRNA组GSIS无明显影响,该组细胞GSIS水平明显低于空转染组和对照siRNA转染组(P＜0.01).FFAs长期干预明显抑制空转染组、对照siRNA转染组细胞GSIS水平,对GPR40 siRNA组GSIS无明显影响.空转染组、对照siRNA组GSIS水平低于GPR40siRNA组(P＜0.05).激光共聚焦显微镜结果显示,在GSIS过程中,FFAs短期干预后,GPR40 siRNA组胞内钙离子浓度峰值明显低于对照siRNA组(棕榈酸:5.10 vs 7.02,油酸:4.27 vs 6.21,均P＜0.05);而FFAs长期干预后,GPR40 siRNA组胞内钙离子浓度峰值明显高于对照siRNA组(棕榈酸:3.24 vs 1.21,油酸:2.83 vs 1.18,均P＜0.05).结论 GPR40介导FFAs对GSIS和胞内钙离子浓度变化的短期刺激和长期抑制作用.