| 裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 夏鹏,魏建超,陆莹梅,武专昌,李蓓蓓,刘珂,邵东华,邱亚峰,钟登科,温贵兰,马志永.裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析北大核心CSCD[J].中国人兽共患病杂志,2015(7):607-611. |
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| 作者姓名： | 夏鹏 魏建超 陆莹梅 武专昌 李蓓蓓 刘珂 邵东华 邱亚峰 钟登科 温贵兰 马志永 |
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| 作者单位： | 1.中国农业科学院上海兽医研究所200241;2.贵州大学动物科学学院550025;3.上海农林职业技术学院201600; |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划(2013BAD12B05)；国家自然科学基金(31302116)；上海高校青年教师培养资助计划(ZZnlzl2003)；上海农林职业技术学院院级科研项目(091227)~~ |
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| 摘 要： | 目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。
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| 关 键 词： | 裂谷热病毒 Gn蛋白 原核表达 蛋白纯化 |
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