| 羊口疮病毒F1L和B2L基因真核表达质粒构建及其在MDBK细胞中的表达北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 刘嫒,冯将,鲜思美,刘宗胜,李鹏飞,罗代兵.羊口疮病毒F1L和B2L基因真核表达质粒构建及其在MDBK细胞中的表达北大核心CSCD[J].中国人兽共患病杂志,2015(12):1124-1128. |
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| 作者姓名： | 刘嫒 冯将 鲜思美 刘宗胜 李鹏飞 罗代兵 |
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| 作者单位： | 1.贵州大学动物科学学院550025;2.贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室550025;3.毕节市动物产品质量安全监督检验所551700; |
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| 基金项目： | 贵州省科学技术基金项目[黔科合LH字(2014)7667]；贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队(黔科合人才团队[2015]4016)；毕节市科技局项目[毕科合字(2012)24号]~~ |
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| 摘 要： | 目的为构建羊口疮病毒F1L和B2L基因真核表达质粒,同时验证其在MDBK细胞中的表达。方法本试验以pVAX1为真核表达载体,在前期构建的克隆质粒pMD18-T-B2L和pMD18-T-F1L基础上,构建真核表达质粒pVAX1-F1L和pVAX1-B2L,对其分别进行双酶切和测序鉴定,将鉴定正确的真核表达质粒pVAX1-F1L和pVAX1-B2L转染至MDBK细胞,采用RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)检测目的基因表达。结果双酶切鉴定和序列测定表明真核表达质粒pVAX1-F1L和pVAX1-B2L构建成功,RT-PCR和IFA同时验证目的基因在MDBK细胞浆中能瞬时表达。结论本试验构建成功的真核表达质粒为下一步羊口疮病毒核酸疫苗研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 羊口疮病毒 F1L基因 B2L基因 真核表达 |
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