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CD95基因抑制胃癌细胞生长的体外抑瘤效应
引用本文:肖冰 时永全. CD95基因抑制胃癌细胞生长的体外抑瘤效应[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 1999, 8(4): 254-258
作者姓名:肖冰 时永全
作者单位:第一军医大学南方医院消化疾病研究所!广州510515,第四军医大学西京医院全军消化病研究所!陕西省西安市710032,第四军医大学西京医院全军消化病研究所!陕西省西安市710032,第四军医大学西京医院全军消化病研究所!陕西省西安市710032,第四军医大学西京医院全军消化病研究所!陕西
摘    要:目的 将CD95基因导入胃癌细胞 ,建立CD95基因表达株 ,并比较转导前后mRNA与蛋白的表达水平。观察CD95蛋白对体外培养胃癌细胞的抑制作用。方法 采用分子克隆技术将CD95基因插入真核表达载体pBK CMV的多克隆克隆位点之间 ,以脂质体介导法将目的基因导入受体细胞SGC790 1,用G418筛选克隆细胞 ;以Northernblot,Westernblot检测CD95基因的表达。MTT法检测转导株对化疗药物的敏感性 ;直接记数法描述转导株的细胞生长曲线 ;软琼脂集落形成实验观察基因转导前后细胞的克隆形成力。结果 成功地构建了真核表达载体pBK CD95cDNA。转导细胞后 ,从 1× 10 5细胞中筛选出 10 0个抗性克隆以上 ,转导率大于 0 1% ,随机挑选 2个克隆扩增培养 ,获得了 1株稳定的抗性细胞 ,从而有效地建立了CD95基因表达株 (SGC790 1CD95cells)。杂交结果表明 ,转导株在mRNA及蛋白水平的表达均明显高于非转导株。转导细胞的细胞倍增时间、对数生长期等均体现了比非转导株更为缓慢和处于抑制状态 ,集落形成能力低下 ,而对VCR、5 FU等化疗药物的敏感性明显增强。结论 CD95基因在胃癌细胞中处于低表达状态 ;通过真核表达载体的介导 ,CD95基因导入胃癌细胞后 ,能有效地表达CD95mRNA及其蛋白。CD95基因转导株的表达蛋白能有效地抑制体外培

关 键 词:CD95基因  基因转导  真核表达  基因治疗  细胞凋亡

In vitro anti tumor effects of CD95 gene in a gastric cancer cell line
Xiao Bing ,Shi Yongquan ,Zhao Yanqiu ,et al.. In vitro anti tumor effects of CD95 gene in a gastric cancer cell line[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 1999, 8(4): 254-258
Authors:Xiao Bing   Shi Yongquan   Zhao Yanqiu   et al.
Affiliation:Xiao Bing 1,Shi Yongquan 2,Zhao Yanqiu 2,et al 1.Institute of Digestive Diseases,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515 2.Institute of Digestive Diseases,Xijing Hospital,Forth Military Medical University
Abstract:
Keywords:CD95gene Gene transfer Gene therapy Gene expression Stomach neoplasm
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