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小鼠重组釉蛋白基因稳定表达细胞系的建立
引用本文:娄雅莉,孙樱林,赵铁强,刘国庆,冯海兰. 小鼠重组釉蛋白基因稳定表达细胞系的建立[J]. 北京大学学报(医学版), 2008, 40(2): 151-154
作者姓名:娄雅莉  孙樱林  赵铁强  刘国庆  冯海兰
作者单位:(1.北京大学口腔医学院口腔医院修复科,北京 100081;2.北京大学心血管研究所基因转移与基因治疗实验室)
基金项目:北京大学211工程重点学科建设项目 , 国家自然科学基金
摘    要:目的:构建小鼠重组釉蛋白基因的真核表达系统,并建立稳定表达该蛋白的细胞系.方法:取初生小鼠牙胚组织,提取 RNA,用 RT-PCR 技术扩增釉蛋白基因片段,经双酶切后克隆至真核表达载体 pcDNA3.1TM/myc-His(-)B 上, 转化大肠杆菌E.coli DH5α, 中提质粒,将该重组表达质粒转染至 HEK 293A 细胞,用 G418 筛选出阳性克隆,并检测釉蛋白的表达水平.结果:通过测序表明,小鼠釉蛋白基因被成功地连接到了真核表达载体上.将该表达系统转染 HEK 293A 细胞后,进行 Western Blot 检测,证明其中有相对分子质量约 32 000 的釉蛋白表达.结论:成功构建了小鼠重组釉蛋白真核表达载体,建立了稳定细胞系,为获得高纯度的釉蛋白,为进一步研究蛋白质功能奠定了基础.

关 键 词:牙釉质蛋白质类  基因表达  细胞系  小鼠  
文章编号:1671-167X(2008)02-0151-04
修稿时间:2007-04-29

Construction of the stable cell line expressing the mouse recombinant enamelin gene
LOU Ya-li,SUN Ying-lin,ZHAO Tie-qiang,LIU Guo-qing,FENG Hai-lan. Construction of the stable cell line expressing the mouse recombinant enamelin gene[J]. Journal of Peking University. Health sciences, 2008, 40(2): 151-154
Authors:LOU Ya-li  SUN Ying-lin  ZHAO Tie-qiang  LIU Guo-qing  FENG Hai-lan
Affiliation:Department of Prosthodontics, Peking University School & Hospital of Stomatology, Beijing 100081, China.
Abstract:
Keywords:Dental enamel proteins  Gene expression  Cell line  Mice  
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