TT病毒结构蛋白抗原在大肠杆菌中的表达及应用

目的 用原核系统表达TT病毒（TTV）的重组蛋白抗原，建立诊断（TTV）感染的特异性方法。方法 采用PCR方法扩增TTVORF2基因，将之插入到测序质粒载体中进行测序，验证序列正确后将之嵌入到原核表达载体pQE30中，并转化大肠杆菌M15菌株，进行诱导表达。用SDS－PAGE分析表达产物。表达产物经Ni-NTA柱层析纯化后，得到纯度为90％的ORF蛋白抗原。用TTV感染者的阳性血清对该蛋白进行了Western-Blot分析，用间接ELISA方法检测血清抗－（TTV）IgG抗体。结果 经IPTG诱导后，筛选出2株高表达株。结论 该蛋白具有良好的抗原活性，可以有效地用于TTV的感染检测中。