新鲜和冷冻保存的人羊膜中bFGFmRNA的检测 |
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引用本文: | 柯碧莲,张皙,许迅,邱孝芝,沈卫英,申庆祥.新鲜和冷冻保存的人羊膜中bFGFmRNA的检测[J].眼科新进展,2004,24(5):358-360. |
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作者姓名: | 柯碧莲 张皙 许迅 邱孝芝 沈卫英 申庆祥 |
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作者单位: | 1. 200080,上海,上海交通大学附属第一人民医院眼科 2. 200031,上海,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 3. 200032,上海市计划生育研究所 |
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摘 要: | 目的 研究新鲜和冷冻保存羊膜中是否存在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA。方法 从新鲜和保存1周羊膜中用常规的酚、氯仿法抽提总RNA,RT-PCR一步法扩增。PCR产物回收后与PBS质粒同时以EcoRⅠ、HindⅢ双酶切.将酶切产物通过T4DNA连接酶连接,重组质粒。将重组质粒导入感受态的DH5a大肠杆菌中.筛选阳性菌落抽提质粒后行酶切鉴定.选取阳性克隆测序。结果 RT-PCR产物电泳.可见单一清晰的条带,约410bp。重组质粒酶切后见二条带,小带约410bp,与插入片段一致,测序结果表明目的片段与bFGF的序列完全相同。结论 新鲜和冷冻保存的羊膜组织中存在bFGF的mRNA。
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关 键 词: | 羊膜 反转录PCR 碱性成纤维细胞生长因子 |
文章编号: | 1003-5141(2004)05-0358-03 |
修稿时间: | 2003年7月3日 |
Basic fibroblast growth factor mRNA in fresh and cryopreserved human amniotic membrane |
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