反相高效液相色谱法测定千层纸素的含量和有关物质

目的建立测定千层纸素的含量和有关物质的RP-HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为ODS-2(4.6 mm×150 mm,5μm),甲醇-乙腈-10 mmol·L~(-1)磷酸二氢钾(用磷酸调节pH值至2.5)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长271 nm。结果在含量测定色谱条件下,千层纸素浓度在2.02~20.23μg·m L~(-1)内与峰面积呈良好线性关系(r=1.000,n=6);在有关物质测定色谱条件下,有关物质黄芩素、汉黄芩素、杂质Ⅰ分别在质量浓度0.0197~0.7872μg·m L~(-1)(r=1.000,n=6)、0.0313~0.6250μg·m L~(-1)(r=0.9997,n=6)、0.0818~2.0440μg·m L~(-1)(r=0.9999,n=5)内与峰面积呈良好的线性关系;黄芩素、杂质Ⅰ和各杂质总含量分别为0.11%、0.39%、0.57%。结论本方法灵敏度高、重现性好、准确可靠,可用于千层纸素有关物质的检测分析及质量控制。

Determination of related substances and content of oroxylin A by RP-HPLC