EcoRI限制及修饰酶基因的克隆和高效表达研究(简报) |
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作者姓名: | 陈树滋 强伯勤 徐勤学 梁植权 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所(陈树滋,强伯勤,徐勤学),中国医学科学院基础医学研究所(梁植权) |
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摘 要: | 限制性内切酶是进行基因分析和DNA重组不可少的工具。EcoRI是其中最常用的酶之一.本文简述了利用重组DNA技术克隆EcoRI的限制和修饰酶基因及其高效表达的研究结果. 据文献报导,EcoRI的限制和修饰酶基因定位于质粒DNA上.我们从酶的生产菌株E.coli~5RY13中纯化了一种分子量约为9kb(千硷基对)的质粒DNA,并藉PvuⅡ和BstNI联合酶解,分得一含限制和修饰酶基因的片段(~2.2kb)。片段用Klenow酶补齐末端后,经平端连接插入pBR32
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