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人IL-1 Ra基因真核表达载体的构建及体外转染大鼠骨髓间充质干细胞
引用本文:王刚,吕同德,哈小琴,常雅萍.人IL-1 Ra基因真核表达载体的构建及体外转染大鼠骨髓间充质干细胞[J].西北国防医学杂志,2007,28(6):431-433.
作者姓名:王刚  吕同德  哈小琴  常雅萍
作者单位:1. 吉林大学基础医学院免疫学教研室,吉林,长春,130021
2. 兰州军区兰州总医院实验科
摘    要:目的:构建人IL-1Ra真核表达载体,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)。方法:从PHA活化的人外周血单个核细胞中提取总RNA,RT-PCR法获得hIL-1Ra cDNA,经HindⅢ、EcoRⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcD-NA3。经酶切分析及PCR鉴定后,脂质体介导下体外转染大鼠BM-MSCs,免疫荧光法检测hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达。结果:获得570 bp大小的IL-1Ra cDNA片段;经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序,证实IL-1Ra cDNA定向插入pcDNA3质粒,目的序列与GenBank源序列完全一致;脂质体介导转染48h后,免疫荧光检测到hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达。结论:成功构建pcDNA3-hIL-1Ra真核表达载体并在大鼠BM-MSCs中表达,为进一步的hIL-1Ra基因修饰MSCs研究提供了实验基础。

关 键 词:基因转染  干细胞  骨髓  间充质
文章编号:1007-8622(2007)06-0431-03
收稿时间:2007-06-13
修稿时间:2007年6月13日

Construction of eukaryotic expression vector carrying human IL - 1 receptor antagonist gene and transfection into rat bone marrow mesenchymal stem cells in vitro
WANG Gang, LU Tong - de, HA Xiao - qin,et al..Construction of eukaryotic expression vector carrying human IL - 1 receptor antagonist gene and transfection into rat bone marrow mesenchymal stem cells in vitro[J].Medical Journal of National Defending Forces in Northwest China,2007,28(6):431-433.
Authors:WANG Gang  LU Tong - de  HA Xiao - qin  
Institution:WANG Gang, LU Tong - de, HA Xiao - qin, et al.
Abstract:
Keywords:IL-1Ra
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