转录抑制因子ZHX2功能片段原核表达载体的构建及表达 |
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作者姓名: | 赵红蕾 曹宏 孙月芳 田晓丰 |
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作者单位: | 1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 2. 吉林大学第二医院普外科中心 |
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摘 要: | 目的 从人正常组织中克隆人转录抑制因子ZHX2功能片段,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,纯化获得蛋白,用于下一步探讨ZHX2基因的功能.方法 根据 GenBank中ZHX2功能片段已知序列设计引物,从正常人组织中通过RT-PCR方法扩增ZHX2基因功能片段,克隆到原核表达载体pET28a(+)中,转化Ecoli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白.结果 测序结果显示克隆的ZHX2基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,Western-blot鉴定结果显示表达产物为人ZHX2功能片段特异性蛋白.结论 本研究成功构建了含有ZHX2功能片段的原核融合表达载体,并实现了ZHX2功能片段的表达,获得了纯化的蛋白,为进一步研究ZHX2基因的功能奠定了基础.
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关 键 词: | ZHX2基因 转录抑制因子 原核表达 |
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