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| 蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用 | |
| 引用本文： | 牛晓璐,许万福,李松玉,柯志勇,曾方银,罗深秋,邓凡.蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用[J].南方医科大学学报,2013,33(3):351-355. |
| 作者姓名： | 牛晓璐 许万福 李松玉 柯志勇 曾方银 罗深秋 邓凡 |
| 作者单位： | 牛晓璐 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515;南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)； 许万福 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)；李松玉 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515;南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)； 柯志勇 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)； 曾方银 (南方医科大学南方医院检验科,广东广州,510515)； 罗深秋 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)； 邓凡 (南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室,广东广州510515南方医科大学骨科研究所,广东广州510515)； |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(项目编号：30973014,81272852)广东省自然科学基金(项目编号：10151051501000040)广东省自然科学基金博士启动基金(项目编号：9451051501003704) |
| 摘 要： | 目的研究蛋白激酶D1（PKD1）在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用，为进一步探讨PKD1在烟曲 霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和 HEK293细胞中，分别将灭活的烟曲霉分生孢子（1×105 CFU/ml）于不同时间处理上述两组细胞，Western blotting证实PKD1的 过表达，并检测PKD1的磷酸化活性；其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理 细胞30 min，分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性；最后，将NF-κB-luc 荧光素酶报告基因及内参照报告质 粒海肾荧光素酶（pRL-SV40）共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中，两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理 24 h，收集细胞裂解液，进行双色荧光素酶活性检测。结果Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激 的A549细胞和HEK293 细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性，反之，敲低PKD1的表 达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激 活活性。结论PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。 |
| 关 键 词： | 蛋白激酶D1 烟曲霉分生孢子 NF-κB 转录激活 磷酸化 |
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