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TGF-β1对胃癌细胞增殖、凋亡及miR-302a和AKT通路的影响
作者姓名:邵建富  李兴海  马文杰  李文  王敬瑄  韩素桂
作者单位:唐山市人民医院普外科;唐山市人民医院核医学检验科
基金项目:唐山市科技计划项目(No.17130244a)。
摘    要:目的探究转化生长因子-β1(TGF-β1)对胃癌细胞增殖、凋亡及miR-302a和AKT通路的影响.方法在含有TGF-β1(0、1、5、10 ng/ml)的培养基培养胃癌细胞系BGC-823,MTT法检测细胞增殖情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数量;Hoechst33258染色观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡以及周期阻滞情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞miR-302a表达;蛋白印迹(WB)法检测p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达情况.结果与Control组相比,TGF-β1处理组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高,细胞克隆数量降低,且随着TGF-β1浓度的增加,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率逐渐升高,细胞克隆数量逐渐降低(P<0.05).与Control组相比,TGF-β1处理组G1期细胞比例显著增加,G2期细胞比例显著降低,且随着TGF-β1浓度的增加,G1期细胞比例逐渐增加,G2期细胞比例逐渐降低(P<0.05).与Control组相比,TGF-β1处理组miR-302a表达升高,p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均显著降低,且随着TGF-β1浓度的增加,miR-302a表达逐渐升高,p-PI3K、p-AKT蛋白表达逐渐降低(P<0.05).结论TGF-β1可能通过上调miR-302a表达、抑制AKT通路,使细胞G1期阻滞,从而抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡.

关 键 词:胃癌  转化生长因子-Β1  磷脂酰肌醇激  蛋白激酶B  微小RNA
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