| HMGB1 B盒编码序列的克隆和大肠杆菌表达 |
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| 引用本文： | 姜南艳,于文彬,苏明权,李斌,郝晓柯,李立文. HMGB1 B盒编码序列的克隆和大肠杆菌表达[J]. 医学争鸣, 2005, 26(3): 199-201 |
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| 作者姓名： | 姜南艳 于文彬 苏明权 李斌 郝晓柯 李立文 |
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| 作者单位： | 第四军医大学西京医院,检验科临床分子生物学研究中心,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院,全军骨科研究所,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 陕西省科技攻关项目，2004K10-G4， |
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| 摘 要： | 目的：克隆小鼠高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1，HMGB1)B盒编码序列并在大肠杆菌中表达GST—B盒融合蛋白．方法：从新生小鼠肺组织提取总RNA，经RT—PCR获得HMGB1 B盒编码序列．将酶切后PCR产物克隆到pGEX-4T-2载体的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ位点之间，经双酶切鉴定后测序证实．用pGEX-4T-2-B转化BI21(DE3)感受态细胞，在30℃经IPTG诱导表达5h后进行SDS-PAGE分析．结果：测序结果证实成功获得了小鼠HMGB1 B盒编码序列，其序列与GenBank中报道序列完全一致．SDS-PAGE分析表明，在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了GST-B盒蛋白，表达量约占菌体总蛋白的30％，结论：成功克隆小鼠HMGB1 B盒编码序列并在大肠杆菌中获得了高效表达。
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| 关 键 词： | 高迁移率族蛋白1 试剂盒 诊断 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2005)03-0199-03 |
| 修稿时间： | 2004-09-22 |
Cloning and expression of mouse HMGB1 B box coding sequence |
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| JIANG Nan-Yan ,YU Wen-Bin ,SU Ming-Quan ,LI Bin ,HAO Xiao-Ke ,LI Li-Wen Centre of Clinical Molecular Biology. Cloning and expression of mouse HMGB1 B box coding sequence[J]. Negative, 2005, 26(3): 199-201 |
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| Authors: | JIANG Nan-Yan YU Wen-Bin SU Ming-Quan LI Bin HAO Xiao-Ke LI Li-Wen Centre of Clinical Molecular Biology |
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| Affiliation: | JIANG Nan-Yan 1,YU Wen-Bin 1,SU Ming-Quan 1,LI Bin 1,HAO Xiao-Ke 1,LI Li-Wen 2 1Centre of Clinical Molecular Biology,2Institute of Orthopaedics of Chinese PLA,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HMGB1 reagent kits diagnostic gene expression |
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