计算机辅助设计HER2／neu酪氨酸激酶小分子抑制剂人生物活性研究

目的：用计算机辅助设计法寻找HER2／neu受体酪氨酸激酶小分子抑制剂。方法：用MODERLAR软件模拟出HER2／neu和EGFR受体酪氨酸激酶的三维（three-dimensional,3D)空间结构；根据HER2／neu酪氨酸激酶ATP结合区的空间结构，搜索数据库，找出候选化合物；用Western blot方法检测化合物对HER2／neu受体酪氨酸激酶磷酸化的影响；MTT法检测细胞增殖抑制作用。结果：比较HER2／neu和EGFR（靶蛋白）与胰岛素受体酪氨酸激酶、FGR1受体酪氨酸激酶和Src酪氨酸激酶（模板蛋白）的氨基酸序列发现有35％－41％的相同和52％－55％的相似，用MODELLER程序模拟出HER2／neu和EGFR激酶区域的3D结构，根据HER2／neu受体氨酸激酶结构模型，3D数据库的搜索，获得潜在HER2／neu酪氨酸激酶抑制化合物，经筛选、优化发现ST2325对HER2／neu磷酸化有明显的抑制作用，其IC50值为6．6μmol／L，且抑制作用是可逆的，对EGFR受体磷酸化没有抑制作用。STS2325对HER2／neu受体表达没有影响。ST2325对HER2／neu过表达的肿瘤细胞MDA－MB－453ml的抑制作用更强，而对EGFR过表达的肿瘤细胞MDA－MB－468抑制作用相对较弱，其IC50值分别为29．05μmol/L和60．40μmol/L。结论：其于HER2／neu的结构设计，筛选出对HER2／neu酪氨酸激酶有明显选择性抑制作用的ST2325。

Discovery of HER2/neu Tyrosine Kinase Inhibitor through Computer- Aided Drug Design Approach and its Biological Activity