Oncol2012: 初始T细胞来源的效应细胞在荷B16黑色素瘤小鼠免疫治疗中的应用

背景：恶性肿瘤的过继性细胞移植免疫治疗已投入临床使用多年。如何提高效应细胞的杀伤能力，如肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，已经成为临床肿瘤免疫治疗的一个重要的努力方向。因此，我们探索了一种新的方法通过使用一定比例混合的CD4 、CD8 亚种群的初始T淋巴细胞来制备更有效的特异CTL并评价其肿瘤杀伤效率。方法：实验使用荷B16恶性黑色素瘤的C57BL/6老鼠，并给予CTX腹腔注射进行预处理。分别评估CTX腹腔注射对肿瘤生长的影响情况及对肿瘤微环境的调节情况。应用磁珠分别阴性分选初始T细胞和总T细胞。在体外环境中检测并对比不同种T细胞的增殖能力以及细胞因子分泌水平。分别由初始T细胞（初始CD4 T：初始CD8 T=2:1）和总T细胞诱导分化得到肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞。经CTX预处理的实验小鼠给予肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞回输治疗，回输后检测效应细胞的归巢能力，检测肿瘤组织中IL-2、IFN-r、颗粒酶 B, 及穿孔素mRNA 水平，并测量肿瘤大小绘制生存曲线。结果：CTX预处理组较对照组肿瘤生长情况无差异，但CTX预处理后较对照组可明显降低实验鼠脾脏中Treg细胞水平，以及血清中TGF-β1和IL-10 的水平（P＜0.05）。在体外初始T细胞较总T细胞表现出更强的增殖能力及细胞因子分泌能力（P＜0.05）。由初始T细胞诱导产生的效应细胞与由总T细胞诱导产生的效应细胞在归巢能力方面有显著差异（P＜0.05），肿瘤组织中IL-2、IFN-r、颗粒酶 B 及穿孔素mRNA 水平存在显著差异（P＜0.05）。结论：依据上述结果，我们认为由初始T细胞诱导产生的效应细胞拥有更强的增值能力、更强的归巢能力及细胞因子分泌水平，所以由初始T细胞诱导产生的效应细胞可以介导产生更强的抗肿瘤效应。

Effector cells derived from naive T cell used in tumor immunotherapy of mice bearing B16-melanoma