| Tet-on基因表达系统反应质粒P~(TRE-HIF-1α)的构建和表达鉴定 |
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| 引用本文： | 徐宗全,陈孝平,张万广,王其,关剑,李高鹏.Tet-on基因表达系统反应质粒P~(TRE-HIF-1α)的构建和表达鉴定[J].中国普外基础与临床杂志,2008,15(12). |
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| 作者姓名： | 徐宗全 陈孝平 张万广 王其 关剑 李高鹏 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目
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| 摘 要： | 目的克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的Tet-on基因表达系统反应质粒P^TRE-HIF-1α。方法以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板，进行RT-巢式PCR，获得HIF-1α的cDNA，克隆人Tet-on基因表达系统反应质粒P^TRE2hyg，酶切重组子鉴定。将构建好的P^TRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2^Tet-on细胞，在强力霉素的作用下，用RT-PCR及Western blot法鉴定重组质粒的表达。结果扩增出HIF-1α的eDNA测序结果与Genbank记载完全一致，并成功克隆人P^TRE2hyg，将反应质粒P^TRE-HIF-1α转入HepG2^Tet-on细胞，可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控。结论成功克隆和构建携带HIF-1α基因的Tet-on基因表达系统反应质粒P^TRE-HIF-1α，并证明其表达能在HepG2^Tet-on细胞中受强力霉素调控。
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| 关 键 词： | 胰腺移植 免疫耐受 移植嵌合体 |
Construction and Expression Analysis of Recombinant Vector PTRE-HIF-1α of Tet-on Gene Expression System |
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| XU Zong-quan,CHEN Xiao-ping,ZHANG Wan-guang,WANG Qi,GUAN Jian,LI Gao-peng.Construction and Expression Analysis of Recombinant Vector PTRE-HIF-1α of Tet-on Gene Expression System[J].Chinese Journal of Bases and Clinics In General Surgery,2008,15(12). |
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| Authors: | XU Zong-quan CHEN Xiao-ping ZHANG Wan-guang WANG Qi GUAN Jian LI Gao-peng |
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| Institution: | XU Zong-quan,CHEN Xiao-ping,ZHANG Wan-guang,WANG Qi,GUAN Jian,LI Gao-peng.Hepatic Surgery Center,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science , Technology,Wuhan 430030,China |
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| Abstract: | |
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