| 人胸腺肽β4基因在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及促血管生成生物活性研究 |
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| 引用本文： | 贾琪,华子春.人胸腺肽β4基因在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及促血管生成生物活性研究[J].东南大学学报(医学版),2007,26(4):295-298. |
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| 作者姓名： | 贾琪 华子春 |
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| 作者单位： | 南京大学,医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093 |
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| 摘 要： | 目的：在大肠杆菌中克隆和表达人源胸腺肽（thymosinβ4,TB4）基因并进行分离纯化及促血管生成生物活性鉴定。方法：人工设计TB4基因片段,其密码子为大肠杆菌所偏爱,将合成的寡核苷酸片段经分子克隆拼接成TB4基因片段,与pET28a（＋）载体连接成重组表达质粒pET28a-TB4,将其转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His6-TB4,通过镍柱亲和层析纯化,采用SDS-PAGE分析鉴定,由CAM试验进行重组蛋白活性的生物活性鉴定。结果：经DNA序列分析鉴定,重组质粒pET28a-TB4构建成功,IPTG诱导后的融合蛋白His6-TB4在大肠杆菌中得到高效表达,并经一步镍柱亲和层析即获得纯化。CAM试验证明其有促进毛细血管生成的活性。结论：获得高效表达的、高纯度的His6-TB4融合蛋白,为TB4的进一步的功能分析和促血管生成生物活性研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人胸腺肽β4 表达 镍柱纯化 鸡胚尿囊膜实验 |
| 文章编号： | 1671-6264(2007)04-0295-04 |
| 修稿时间： | 2006年5月15日 |
Cloning, expression, purification and angiogenic activity of human thymosin β4 in E. Coli |
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| JIA Qi,HUA Zi-chun.Cloning, expression, purification and angiogenic activity of human thymosin β4 in E. Coli[J].Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed,2007,26(4):295-298. |
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| Authors: | JIA Qi HUA Zi-chun |
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