| 流行性腮腺炎病毒荧光定量逆转录-聚合酶链反应快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 冯燕,卢亦愚,严菊英,史雯,周敏. 流行性腮腺炎病毒荧光定量逆转录-聚合酶链反应快速检测方法的建立[J]. 中国疫苗和免疫, 2006, 12(5): 394-398 |
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| 作者姓名： | 冯燕 卢亦愚 严菊英 史雯 周敏 |
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| 作者单位： | 浙江省疾病预防控制中心 杭州310009 |
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| 基金项目： | 浙江省科学技术厅攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测流行性腮腺炎(腮腺炎)病毒(MuV)核酸。方法针对MuV血凝素(H)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、灵敏度与准确性;并通过体外克隆技术建立MuV基因拷贝数定量分析模型。结果引物与探针的优化浓度分别为880mmol/L和280mmol/L,具有良好的保守性和特异性,与其它呼吸道病毒均无交叉反应;方法检测灵敏度为10拷贝/反应,相当于0.01TCID50,标准曲线线性范围为107~10拷贝/反应;从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好。结论TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法特异、敏感、快速,为MuV的早期快速检测提供了一种新的检测技术。
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| 关 键 词： | 流行性腮腺炎病毒 荧光定量逆转录-聚合酶链反应 TaqMan-MGB探针 |
| 文章编号： | 1006-916X(2006)05-0394-05 |
| 修稿时间： | 2006-05-09 |
Development of Rapid Real-Time RT-PCR Method for Detection of Mumps Virus |
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| FENG Yan,LU Yi-yu,YAN Ju-Ying,et al.. Development of Rapid Real-Time RT-PCR Method for Detection of Mumps Virus[J]. Chinese Journal of Vaccines and Immunization, 2006, 12(5): 394-398 |
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| Authors: | FENG Yan LU Yi-yu YAN Ju-Ying et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mumps virus Real-time RT-PCR TaqMan-MGB probe |
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