EMA-PCR方法快速检测铜绿假单胞菌活菌研究

目的 探讨将叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide，EMA)选择渗透性与PCR技术相结合（EMA-PCR），建立有效快速检测铜绿假单胞菌活菌的方法。方法 以铜绿假单胞菌oprI基因为PCR检测靶基因，纯培养物提取模板进行PCR，检测PCR灵敏度、EMA使用浓度和曝光时间优化试验。结果 PCR检测灵敏度为3×103 CFU/mL；曝光处理时间为10 min；EMA浓度≤5 μg/mL对活菌DNA扩增没有明显抑制，终浓度为1 μg/mL EMA能有效抑制3×106 CFU/mL死菌扩增；1%活菌混合体系检测结果阳性。结论 EMA-PCR方法能有效快速检测铜绿假单胞菌活菌，能避免PCR检测可能造成的假阳性结果。

Study on Rapid Detecting of Live Pseudomonas Aeruginosa by EMA-PCR