| 摘 要： | 目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧格尔德霉素(17-AAG)联合紫杉醇对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖和凋亡的影响。方法 1采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT比色法)测定不同浓度(17-AAG:0.312 5、0.625 0、1.250 0、2.500 0及5.000 0μmol/L;紫杉醇:0.001 0、0.010 0、0.100 0及1.000 0μmol/L)、不同时间(24、48及72 h)17-AAG、紫杉醇单药和联合处理(17-AAG:0.625 0μmol/L,紫杉醇:0.001 0、0.010 0、0.100 0及1.000 0μmol/L)后FRO细胞的增殖抑制率。2采用流式细胞仪检测17-AAG、紫杉醇单药及联合处理24 h后(17-AAG:0.625 0μmol/L、紫杉醇:0.100 0μmol/L;联合用药:17-AAG的浓度为0.625 0μmol/L,紫杉醇的浓度为0.100 0μmol/L)FRO细胞的细胞周期变化及凋亡率。3采用胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9检测试剂盒检测17-AAG、紫杉醇单药及联合处理24 h后(17-AAG:0.625 0μmol/L、紫杉醇:0.100 0μmol/L;联合用药:17-AAG的浓度为0.625 0μmol/L,紫杉醇的浓度为0.100 0μmol/L)后FRO细胞中的Caspase-3和Caspase-9活性。空白对照组均不加任何药物,只加培养液。结果 1同时点空白对照组、各剂量17-AAG组/紫杉醇组/17-AAG联合紫杉醇组的增殖抑制率随浓度升高而逐渐升高,任2组比较差异均有统计学意义(P0.05);各剂量17-AAG组/紫杉醇组/17-AAG联合紫杉醇组的增殖抑制率在24、28及72 h逐渐增高,任2组比较差异均有统计学意义(P0.05);同时点同浓度情况下,17-AAG联合紫杉醇组的增殖抑制率均高于单独用药组(P0.05)。各时点17-AAG与紫杉醇联合的q值均大于1.15,两者之间呈协同作用。2 17-AAG组、紫杉醇组及17-AAG联合紫杉醇组FRO细胞的凋亡率均明显高于空白对照组(P0.05),且17-AAG联合紫杉醇组FRO细胞的凋亡率高于17-AAG组和紫杉醇组(P0.05)。3 17-AAG组、紫杉醇组及17-AAG联合紫杉醇组FRO细胞的Caspase-3和Caspase-9活性均高于空白对照组(P0.05);且17-AAG联合紫杉醇组细胞的Caspase-3和Caspase-9活性均高于17-AAG组和紫杉醇组相应指标(P0.05)。结论 17-AAG和紫杉醇均可明显抑制FRO细胞的增殖并诱导细胞凋亡,联合用药有一定的协同效应,呈剂量依赖关系。
|
