幽门螺杆菌对胃上皮细胞形态与生长的影响

目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)活菌对体外培养的胃上皮细胞形态与生长的影响.方法采用Hp与细胞体外共培养技术,结合细胞计数、MTT检测及Ki-67抗原的免疫组化分析,观察Hp活菌对人胃腺癌细胞系SGC-7901生长增殖的影响,同时参照病毒的致细胞病变效应实验计算Hp引起50%细胞空泡变性所需的最低浓度.结果①细胞毒效应实验表明,3.26×106 CFU/mL的Hp能使50%的细胞出现空泡变性;②细胞计数结果显示,在培养的细胞中加入3.2×104 CFU/mL Hp时,72 h内SGC-7901细胞的数量与未加Hp的对照组基本一样;当Hp浓度增加到1.6×105CFU/mL时,细胞数量较对照组显著增多;但是Hp浓度继续增加5倍后,细胞增殖受到抑制,且随Hp浓度进一步加大,抑制效应愈大,差异有显著性(P＜0.01).③MTT检测结果与细胞计数结果十分相似,当终浓度为1.6×105CFU/mL的Hp与细胞共培养时,可显著促进细胞生长(P＜0.01);但是Hp浓度5倍增加(8×105 CFU/mL)以后,细胞的增殖减少(P＜0.05);当Hp浓度达2×107 CFU/mL和1×108 CFU/mL时,细胞的生长明显被抑制(P＜0.01).④Ki-67抗原的免疫组化分析显示,阳性细胞的胞核呈棕黄色着色,低浓度的Hp(3.2×104 CFU/mL和1.6×105 CFU/mL)作用后,SGC-7901细胞内Ki-67抗原阳性率较对照明显增高(P＜0.01);相反,较高浓度Hp(4×106 CFU/mL和2× 107CFU/mL)作用后,细胞内Ki-67抗原阳性率较对照显著减少(P值分别为0.05与0.01).结论较低浓度的Hp不仅对细胞未显示明显的毒性,反而对细胞的生长增殖有一定的促进作用;而较高浓度的Hp却明显抑制细胞增殖,且浓度越大,抑制作用越显著.Hp对细胞增殖的双向效应可能与其同时具有促进和抑制细胞增殖两类因素有关.本实验结果可用以部分解释人体感染Hp后所表现的不同结局.

Effect of Helicobacter pylori on morphology and growth of gastric epithelial cells