抵抗素基因转染诱导肝性胰岛素抵抗细胞的鉴定

目的 将编码人抵抗素基因的pcDNA 3.1(+)真核表达载体在HepG2肝癌细胞中进行稳定转染,以建立抵抗素诱导的肝性胰岛素抵抗细胞模型.方法 实验分3组:HepG2细胞组;空质粒组;抵抗素基因转染组,通过免疫细胞化学和RT-PCR方法 进行抵抗素基因和蛋白表达鉴定,用微量化的葡萄糖氧化酶法检测细胞对葡萄糖的摄取作用.结果 免疫细胞化学染色结果 表明:与对照组比较,抵抗素基因转染组抵抗素蛋白平均光密度值显著升高(P＜0.01);而空质粒组无显著差异(P＞0.05).RT-PCR扩增产物电泳表明:抵抗素基因转染组有目的 条带出现,而对照组和空质粒组无目的 条带出现,细胞葡萄糖摄取实验表明:抵抗素基因转染细胞对葡萄糖摄取作用下降.结论 过度表达人抵抗素基因的胰岛素抵抗的肝细胞建模成功.