血管紧张素Ⅱ对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及其信号转导机制的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对新生大鼠心肌成纤维细胞(MFs)增殖及蛋白激酶Cε(PKCε)和蛋白激酶Cα(PKCα)的表达及转位的影响,了解AngⅡ的促增殖和信号转导机制.方法 以差速贴壁法原代分离提纯培养SD乳鼠MFs为实验模型,免疫组织化学法鉴定后传代培养,第2-4代MFs分为实验组(加AngⅡ 10-6 mol/L)和对照组(不加AngⅡ)培养;四氮唑盐(MTT)比色法检测MFs增殖;通过间接免疫荧光法观察实验组和对照组PKC亚型ε和α在细胞内的分布和定位,Image-Pro-Plus 4.0版专业图像处理软件对荧光强度进行半定量统计.结果 1.实验组MFs数量较对照组显著增加(P<0.001);2.实验组和对照组荧光显微镜下初步观察:对照组PKC亚型ε存在于细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分,但均较弱;实验组PKC亚型ε在细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分强度明显增强,尤以核-细胞骨架为甚;对照组PKC亚型α主要存在于核-细胞骨架;实验组PKC亚型α在细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分强度均明显增加,尤以核-细胞骨架为甚;且PKC亚型ε和α荧光强度半定量比较,实验组均显著高于对照组(Pa<0.001).结论 AngⅡ有促进MFs增殖的作用,PKC亚型ε、ε可能在MFs信号转导过程中起重要作用.