| 小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段的克隆及其GST融合蛋白的表达和纯化 |
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| 引用本文： | 王欣,刘彤,陈莹,陈杰.小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段的克隆及其GST融合蛋白的表达和纯化[J].中国医科大学学报,2006,35(5):454-457. |
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| 作者姓名： | 王欣 刘彤 陈莹 陈杰 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学公共卫生学院尘肺研究室,辽宁,沈阳,110001
2. 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室,辽宁,沈阳,110001 |
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| 摘 要： | 目的：获取小鼠TSR2—3／TSP-1基因片段，并高效表达和纯化GST—TSR2—3融合蛋白。方法：应用RT—PCR技术，从小鼠肺总RNA中，获得编码TSR2—3的基因片功能片段，测序后，通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2，构建重组表达载体，并导入E.coli BL21宿主菌中，IPTG诱导表达重组的GST融合蛋白，亲和层析纯化表达产物，SDS—PAGE和Westem blot进行分析鉴定。结果：获得小鼠TSR2-3基因片段，测序结果与GenBank的基因序列一致，重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Westem blot分析，在相对分子量39kDa处，出现特异性蛋白条带，重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后，得到了高纯度的融合蛋白。结论：成功克隆小鼠TSR2—3基因片段，并在Ecoli BL21中高效表达，亲和层析后获得高纯度GST—TSR2—3融合蛋白。
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| 关 键 词： | TSP2-3基因 克隆 表达 纯化 |
| 文章编号： | 0258-4646(2006)05-0454-04 |
| 收稿时间： | 2006-01-16 |
| 修稿时间： | 2006年1月16日 |
Cloning of mouse TSR2-3/TSP-1 gene segments and expression and purification of their coding protein fused with GST |
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| WANG Xin,LIU Tong,CHEN Ying,CHEN Jie.Cloning of mouse TSR2-3/TSP-1 gene segments and expression and purification of their coding protein fused with GST[J].Journal of China Medical University,2006,35(5):454-457. |
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| Authors: | WANG Xin LIU Tong CHEN Ying CHEN Jie |
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| Institution: | 1. laboratory of Pneumoconiosis, College of Public Health, China Medical University, Shenyang 110001, China; 2. Department of Cell Biology, College of Basic Medical Sciences |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TSR2-3 gene cloning expression purification |
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