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K562细胞中氯化血红素诱导性表达基因的研究
引用本文:陈汉春,孟巧.K562细胞中氯化血红素诱导性表达基因的研究[J].中华血液学杂志,2003,24(4):185-189.
作者姓名:陈汉春  孟巧
作者单位:410078,长沙,中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心
摘    要:目的 鉴定K562细胞中氯化血红素(hemin)诱导性表达基因。方法 分别提取经hemin诱导培养的K562细胞(tester)和未加诱导剂培养的K562细胞(driver)mRNA,逆转录合成双链cDNA。采用抑制性消减杂交(SSH)技术构建正向消减cDNA库。筛选出阳性克隆。PCR扩增阳性克隆插入片段。反向Northern点杂交确定hemin诱导后表达上调的cDNA片段并测序后与GenBank序列进行Blast,同源性比较分析。结果 发现15个cDNA片段在he加n诱导后表达上调,其中大部分与GenBank中已知功能蛋白质的mRNA序列同源,包括珠蛋白epsion l(globinε1),类谷胱甘肽巯基转移酶Omega(GSTTLp28),含硒蛋白X1(SEPX1),磷酸丙糖异构酶(TP11),核糖体蛋白L7(RPL7),核糖体蛋白S13(RPSl3),铁蛋白轻链(ferritin L polypeptide),珠蛋白gamma A(globin Aγ),RAD51同系物C(TSF51C),铁蛋白重链(ferritin L polypeptide),X盒结合蛋白(XBPl)。受hemin诱导性表达的基因克隆中的部分cDNA片段则同源于GenBank中已登录的mRNA序列,但相应蛋白质的功能尚不清楚,包括cDNA DKFZp4341116,假定蛋白HSPCO14及NOLIR2蛋白质。结论 hemin主要诱导K562细胞红系分化、蛋白质合成及代谢相关基因表达,这些发现为hemin诱导造血祖细胞红系分化的差异基因表达及其进一步功能研究提供了综合性信息。

关 键 词:白血病  K562细胞  氯化血红素  抑制性消减杂交技术
修稿时间:2002年8月12日

Study of hemin-induced gene expression in K562 cells
CHEN Han-chun,MENG Qiao. Research Center for Molecular Biology,XiangYa School of Medicine,Central South University,Changsha ,China.Study of hemin-induced gene expression in K562 cells[J].Chinese Journal of Hematology,2003,24(4):185-189.
Authors:CHEN Han-chun  MENG Qiao Research Center for Molecular Biology  XiangYa School of Medicine  Central South University  Changsha  China
Institution:Research Center for Molecular Biology, XiangYa School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China.
Abstract:
Keywords:Cell line  K562  Hemin  Suppression subtractive hybridization
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