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转基因马铃薯中人白介素-12的生物学活性
引用本文:陈佳瑜,刘喜平,葛正龙.转基因马铃薯中人白介素-12的生物学活性[J].第三军医大学学报,2010,32(15).
作者姓名:陈佳瑜  刘喜平  葛正龙
作者单位:遵义,遵义医学院生物化学教研室,贵州,563003
基金项目:贵州省科委重大攻关项目,贵州省教育厅重点项目 
摘    要:目的 检测转基因马铃薯体系中表达的人白介素-12(human interleukin 12,hIL-12)的肿瘤杀伤活性.方法 通过ELISA法检测转基因马铃薯中hIL-12刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的量以反映生物学活性,并观察hIL-12单克隆抗体对此生物活性的阻断效应;MTT法检测经转基因马铃薯中hIL-12作用的PBMC对NK敏感肿瘤细胞K562的杀伤作用,肿瘤细胞凋亡以Annexin V/PI双染后激光共聚焦显微镜观察.结果 转基因马铃薯叶和块茎中表达的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)标准品在25~400 pg/ml间均能诱生IFN-γ,其中转基因马铃薯叶和块茎中hIL-12刺激PBMC产生IFN-γ的量分别为(163.34±22.17)~(12 107.10±3 996.51)pg/ml和(224.20±25.76)~(11 196.30±4 067.48)pg/ml,与野生对照组均有统计学差异(P<0.01),而hIL-12单克隆抗体能完全阻断此诱生IFN-γ效应.同时200 pg/ml转基因马铃薯叶、块茎中提取的hIL-12对人红白血病细胞K562的杀伤率分别为(28.4±8.7)%、(32.3±6.9)%,而与野生对照组(10.3±4.9)%的杀伤率相比,有统计学差异(P<0.05).激光共聚焦显微镜观察到经转基因马铃薯表达hIL-12作用的K562细胞出现早、中、晚各期的凋亡特征.结论 转基因马铃薯表达的hIL-12具有诱导PBMC产生IFN-γ及杀伤肿瘤细胞K562的生物学活性.

关 键 词:人白介素-12  生物活性  马铃薯  转基因植物

Bioactivity of human interleukin-12 from transgenic potatoes
Chen Jiayu,Liu Xiping,Ge Zhenglong.Bioactivity of human interleukin-12 from transgenic potatoes[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2010,32(15).
Authors:Chen Jiayu  Liu Xiping  Ge Zhenglong
Institution:Chen Jiayu,Liu Xiping,Ge Zhenglong(Department of Biochemistry,Zunyi Medical College,Zunyi,Guizhou Province,563003,China)
Abstract:
Keywords:human interleukin 12  bioactivity  potato  transgenic plant  
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