| My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达 |
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| 引用本文： | 李晓华,郑升,刘优萍,骆天红,罗敏. My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达[J]. 上海医学, 2008, 31(10) |
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| 作者姓名： | 李晓华 郑升 刘优萍 骆天红 罗敏 |
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| 作者单位： | 1. 上海市内分泌代谢病研究所,上海交通大学医学院附属瑞金医院,200025
2. 上海交通大学附属第一人民医院内分泌科 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家高技术研究发展计划(863计划)，上海市重点学科建设项目 |
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| 摘 要： | 目的探索My027蛋白的体外表达,通过原核表达获得大量可溶性My027融合蛋白。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法获得融合蛋白,采用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、Western印迹法及质谱进行鉴定。结果融合蛋白以水溶形式分泌于大肠杆菌BL-21胞质中,纯化后的目的蛋白经SDS-PAGE、Western印迹法及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确。结论人脂肪细胞新蛋白My027在pGEX-4T-2原核表达载体可获高效表达,为进一步研究其功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 蛋白My027 融合蛋白 原核表达 |
Construction of recombination vector harboring My027 fusion protein and its expression in E.coli |
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| LI Xiaohua,ZHENG Sheng,LIU Youping,LUO Tianhong,LUO Min. Construction of recombination vector harboring My027 fusion protein and its expression in E.coli[J]. Shanghai Medical Journal, 2008, 31(10) |
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| Authors: | LI Xiaohua ZHENG Sheng LIU Youping LUO Tianhong LUO Min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Protein My027 Fusion protein Eukaryotic expression |
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