蟹类食物过敏症的ELISA检测试剂的研究

目的研制蟹类食物过敏症的ELISA检测试剂。方法以纯化的中华绒螯蟹主要过敏原蛋白为抗原包被酶标反应板,对包被浓度和包被时间、封闭液的种类与封闭时间、酶标二抗稀释度等ELISA条件进行优化。结果中华绒螯蟹过敏原蛋白的最适包被浓度为100ng/孔,最适包被条件为37℃孵育3h、4℃过夜;酶标反应板的封闭以20g·L-1脱脂奶粉、37℃孵育3h、4℃封闭过夜为最适条件;HRP标记羊抗人IgE抗体以1∶2 500为最适稀释度。结论以中华绒螯蟹的主要过敏原蛋白为诊断抗原制备ELISA检测试剂,适用于临床蟹类食物过敏症的实验诊断。