| pBiG-CAR真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 姜苗苗,申景岭,孙唐娜,王凤梅,王帆,白景玉,卢少玲,张烁.pBiG-CAR真核表达载体的构建及鉴定[J].哈尔滨医科大学学报,2013,47(3):201-204. |
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| 作者姓名： | 姜苗苗 申景岭 孙唐娜 王凤梅 王帆 白景玉 卢少玲 张烁 |
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| 作者单位： | 1. 哈尔滨医科大学附属第二医院心血管病科
2. 哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室,黑龙江哈尔滨,150081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建及鉴定pBiG-CAR真核表达载体.方法 提取C57BL/6胎鼠总RNA,逆转录合成cDNA,经PCR扩增获得CAR基因,与双酶切的pBlue质粒连接,经转化、蓝白筛选及测序鉴定pBlue-CAR载体构建成功.扩增pBlue-CAR的CAR基因,经双酶切后与pBiG质粒连接,构建pBiG-CAR真核表达载体.结果 经琼脂糖凝胶电泳,获得目的基因CAR条带,pBlue-CAR目标条带及pBiG-CAR目标条带.基因测序证实所检测重组质粒序列与pBiG-CAR序列完全一致.结论 克隆C57BL/6鼠CAR基因、pBlue-CAR重组质粒的构建获得成功,并初步证实pBiG-CAR真核表达载体的构建获得成功,为进一步构建可控心肌特异性CAR过表达转基因鼠提供基础.
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| 关 键 词： | 柯萨奇病毒-腺病毒受体 C57BL/6鼠 pBiG质粒 载体构建 |
Construction and identification of pBiG-CAR eukaryotic expression vector |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CAR C57BL/6 mice pBiG vector construction |
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