| 腺病毒载体介导的siRNA对3T3-L1细胞脂联素表达的影响 |
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| 引用本文： | 孟凡萍,杨刚毅,李钶,李伶,齐晓亚,刘建雷,李荣. 腺病毒载体介导的siRNA对3T3-L1细胞脂联素表达的影响[J]. 第三军医大学学报, 2008, 30(14): 1312-1315 |
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| 作者姓名： | 孟凡萍 杨刚毅 李钶 李伶 齐晓亚 刘建雷 李荣 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学医学检验系临床生物化学教研室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学附属第二医院内分泌科,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部春晖计划项目，美国国立卫生研究院资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建携带小鼠脂联素(Acrp30)siRNA腺病毒载体,并检测其对小鼠脂肪细胞Acrp30表达的影响.方法 首先用KpnⅠ NotⅠ双酶切本课题组前期构建的质粒pSilencer1.0-U6-Acrp30-1和pSilencer1.0-U6-Acrp30-3,得到目的 片段U6-Acrp30-1和U6-Acrp30-3,并将目的 片段亚克隆入穿梭质粒pShuttle,用PmeⅠ线性化穿梭质粒pShuttle-U6-Acrp30-1和pShuttle-U6-Acrp30-3,并与pAdeasy-1在BJ5183内同源重组,筛选、鉴定、测序后,在XL10-Gold中扩增重组腺病毒质粒,最后在293细胞内包装扩增为重组腺病毒Ad-Acrp30-1和Ad-Acrp30-3.用此重组腺病毒感染3T3-L1脂肪细胞,用RT-PCR和ELISA检测其Acrp30 mRNA和蛋白表达.结果 设计并构建了小鼠Acrp30 基因特异性siRNA腺病毒载体,该载体感染脂肪细胞后,能显著抑制其Acrp30 mRNA和蛋白表达.结论 构建的Acrp30 基因特异性siRNA腺病毒载体能有效的抑制脂联素基因在3T3-L1脂肪细胞中的表达.
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| 关 键 词： | RNA干扰 腺病毒载体 脂联素 3T3-L1细胞 |
Effects of recombinant adenovirus-mediated siRNA on adiponectin expression in 3T3-L1 cells |
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| MENG Fan-ping,YANG Gang-yi,LI Ke,LI Ling,QI Xiao-ya,LIU Jian-lei,LI Rong. Effects of recombinant adenovirus-mediated siRNA on adiponectin expression in 3T3-L1 cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2008, 30(14): 1312-1315 |
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| Authors: | MENG Fan-ping YANG Gang-yi LI Ke LI Ling QI Xiao-ya LIU Jian-lei LI Rong |
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