肿瘤特异性hTERT启动子与Survivin启动子在肺癌A549细胞中的转录活性研究 |
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引用本文: | 李奕璇,陈全,朱大冕. 肿瘤特异性hTERT启动子与Survivin启动子在肺癌A549细胞中的转录活性研究[J]. 重庆医科大学学报, 2009, 34(2) |
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作者姓名: | 李奕璇 陈全 朱大冕 |
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作者单位: | 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院免疫学教研室,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院免疫学教研室,重庆,400016 |
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摘 要: | 目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据.方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基凶;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED.将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平.结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光.pGL-S-RED质粒在A549细胞巾表达最强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED最弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34.结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有最好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具.
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关 键 词: | 人端粒酶逆转录酶 survivin基因 启动区(遗传学) 肺癌 基因疗法 |
Study on transcriptional activities of tumor-specific hTERT and survivin promoter in human lung cancer A549 cell line |
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Abstract: | |
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