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AANAT基因工程化ES细胞减少APP高表达PC12细胞Aβ的分泌
作者姓名:吴旋  徐海伟  黎海蒂  范晓棠  曹娟  唐军
作者单位:第三军医大学基础医学部:生理学教研室,重庆,400038;第三军医大学基础医学部:神经生物学教研室,重庆,400038
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 3990 0 16 9,30 10 0 0 87),全军“十五”青年基金资助项目 ( 0 1Q0 99),重庆市应用基础基金资助项目 ( 2 0 0 1)
摘    要:目的 构建AANAT基因工程化的胚胎干细胞,并探讨其在阿尔茨海默氏病治疗中的可能作用。方法 将外源性neo基因转染人胚胎成纤维细胞,作为饲养层细胞用于ES细胞转基因后筛选及增殖过程的培养。将pBK-CMV/AANAT真核表面质粒转染小鼠胚胎干细胞,用RT-PCR方法筛选阳性细胞克隆,用此工程细胞的条件培养液培养APP过量表达的PC12细胞,观察β淀粉样蛋白分泌情况。结果 (1)转入neo基因的人胚胎成纤维细胞能很好维持ES2细胞的未分化。(2)AANAT基因工程培养液能减少β淀粉样蛋白的分泌。(3)褪黑素能使PC12/APP细胞Aβ分泌明显减少。结论 首次构建AANAT基因工程化的胚胎干细胞,其减少Aβ分泌的作用可能在阿尔茨海默病的治疗中具有重要应用价值。

关 键 词:褪黑素  阿尔茨海默病  工程细胞  胚胎干细胞  小鼠
文章编号:1000-5404(2003)03-0209-03
修稿时间:2002-10-08
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