| Wistar大鼠c-ski基因部分序列的克隆、测序及实时荧光定量PCR的建立 |
| |
| 引用本文： | 李平,刘苹,熊仁平,赵艳,朱敏,周元国. Wistar大鼠c-ski基因部分序列的克隆、测序及实时荧光定量PCR的建立[J]. 解放军医学杂志, 2009, 34(10): 1221-1224 |
| |
| 作者姓名： | 李平 刘苹 熊仁平 赵艳 朱敏 周元国 |
| |
| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展规划(973计划) |
| |
| 摘 要： | 目的 测定Wistar大鼠c-ski基因部分序列,并应用于检测大鼠c-ski基因表达的实时荧光定量PCR的建立.方法 提取培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞总RNA,通过RT-PCR扩增,将扩增产物克隆到PMD-18T载体上并测序.根据获得的c-ski基因部分序列设计实时荧光定量PCR引物,建立SYBR green定量PCR检测方法,并检测培养的大鼠皮肤成纤维细胞c-ski mRNA表达水平.结果 获得的Wistar大鼠c-ski基因cDNA序列长561bp,为未曾报道的新序列,其与人、小鼠具有较高的同源性,Gen-Bank收录(收入号DQ409171).建立的SYBR green定量PCR检测标准品在103～109拷贝范围内的相关系数为0.991 49.体外培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞样晶中c-ski mRNA水平为(1.024±0.18)×106拷贝/μl.结论 新获得了Wistar大鼠c-ski基因部分序列,该序列可用于实时荧光定量PCR的建立.
|
| 关 键 词： | c-ski 克隆 分子 序列分析 聚合酶链反应 |
Cloning and sequence analysis of partial c-ski gene of Wistar rat, and development of SYBR Green-based real-time fluorescence quantitative PCR |
| |
| LI Ping,LIU Ping,XIONG Ren-ping,ZHAO Yan,ZHU Min,ZHOU Yuan-guo. Cloning and sequence analysis of partial c-ski gene of Wistar rat, and development of SYBR Green-based real-time fluorescence quantitative PCR[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2009, 34(10): 1221-1224 |
| |
| Authors: | LI Ping LIU Ping XIONG Ren-ping ZHAO Yan ZHU Min ZHOU Yuan-guo |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | c-ski |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
