| 新型阳离子聚合物非病毒载体介导野生型p53基因体外转染效果的研究 |
| |
| 引用本文： | 王伟,王玉,王若宁,徐苏颖,丁杨,周建平.新型阳离子聚合物非病毒载体介导野生型p53基因体外转染效果的研究[J].中国临床药理学与治疗学,2011,16(11):1227-1233. |
| |
| 作者姓名： | 王伟 王玉 王若宁 徐苏颖 丁杨 周建平 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国药科大学药剂学教研室,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,南京210009
2. 南京医科大学药理学系,南京210029,江苏 |
| |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，江苏省高校长自然科学研究项目，中央高校基本科研业务费专项资金项目，省级大学生实践创新训练计划项目 |
| |
| 摘 要： | 目的:研究新型阳离子聚合物非病毒载体———尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因体外转染人肝癌细胞系HepG2的效果。方法:载体UAC包裹含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因和wt-p53治疗基因的质粒(pEGFP-p53)转染HepG2细胞,利用流式细胞术和荧光显微术检测细胞内GFP的表达,优选最佳转染条件;采用RT-PCR法检测细胞内p53mRNA的表达,流式细胞术评价基因转染对细胞周期的影响,Western blot法检测细胞内p53及其下游细胞周期调控蛋白的表达。结果:在低pH(pH=6.9)条件下,采用低壳聚糖分子量(20000)的UAC作为载体,与pEGFP-p53形成高N/P(N/P=30)的UAC/pEGFP-p53复合物转染HepG2细胞,可获得最佳转染效果;载体UAC介导wt-p53基因转染细胞后,p53mRNA表达水平明显上调,G0/G1期出现显著阻滞,p53、p21和Rb蛋白表达水平明显上调,cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显下调。结论:载体UAC可成功介导wt-p53基因转染HepG2细胞,并诱导其产生细胞周期阻滞。
|
| 关 键 词： | 尿刊酸修饰的壳聚糖 野生型p53 基因转染 人肝癌细胞系 细胞周期阻滞 |
Study on effects of novel cationic polymer nonviral vector-mediated wild-type p53 gene transfection in vitro |
| |
| WANG Wei,WANG Yu,WANG Ruo-ning,XU Su-ying,DING Yang,ZHOU Jian-ping.Study on effects of novel cationic polymer nonviral vector-mediated wild-type p53 gene transfection in vitro[J].Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics,2011,16(11):1227-1233. |
| |
| Authors: | WANG Wei WANG Yu WANG Ruo-ning XU Su-ying DING Yang ZHOU Jian-ping |
| |
| Institution: | WANG Wei1,WANG Yu2,WANG Ruo-ning1,XU Su-ying1,DING Yang1,ZHOU Jian-ping1 1 Department of Pharmaceutics,State Key Laboratory of Natural Medicines,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,Jiangsu,China,2 Department of Pharmacology,Nanjing Medical University,Nanjing 210029 |
| |
| Abstract: | AIM:To investigate the effects of novel cationic polymer nonviral vector urocanic acid-modified chitosan(UAC)-mediated wild-type p53(wt-p53) gene transfection in human hepatoma cell line HepG2 in vitro.METHODS: UAC packaged the plasmid pIRES2-EGFP-p53(pEGFP-p53) to form the UAC/pEGFP-p53 complexes which transfected HepG2 cells,and the pEGFP-p53 contained a report gene of green fluorescent protein(GFP) and a therapeutic gene of wt-p53.The GFP expression in cells was assayed by flow cytometry and fluorescence... |
| |
| Keywords: | Urocanic acid-modified chitosan Wild-type p53 Gene transfection Human hepatoma cell line Cell cycle arrest |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
