| 抗血小板膜糖蛋白Ibα胞内段多肽多克隆抗体的制备及初步应用 |
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| 引用本文： | 元艳宏,康佳蕊,闫荣,程虹,庄逢源,王月丹,戴克胜.抗血小板膜糖蛋白Ibα胞内段多肽多克隆抗体的制备及初步应用[J].中华医学杂志,2009,89(12). |
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| 作者姓名： | 元艳宏 康佳蕊 闫荣 程虹 庄逢源 王月丹 戴克胜 |
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| 作者单位： | 1. 100083,北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室;中国航天员科研训练中心分子和细胞研究室
2. 北京大学医学部免疫系
3. 北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室,100083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部新世纪优秀人才资助计划，全国优秀博士论文获得者专项基金 |
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| 摘 要： | 目的 制备兔抗人血小板膜糖蛋白(GP)Ibα C端557～561氨基酸序列多肽的多克隆抗体,并初步用于人血小板GPIbα C端559位丝氨酸磷酸化状态的检测.方法 应用化学方法合成C-R-G-S-L-P(559位丝氨酸非磷酸化,Ser559)和C-R-G-s(p)-L-P(559位丝氨酸磷酸化,pSer559)多肽.将2种多肽分别与钥孔蜮血蓝蛋白交联后,以皮下注射法分别免疫新西兰大白兔,分离获得2种抗血清(抗Ser559多抗和抗pSer559多抗).应用斑点印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 对抗血清进行鉴定并检测效价.从人血小板裂解液中分离纯化血小板GPIbα,利用抗Ser559多抗和抗pSer559多抗、采用ELISA方法检测人血小板GPIbαC端559位丝氨酸磷酸化状况.结果 所制备的2种多抗分别特异性识别各自抗原,效价分别为1:32 000和1:64 000.2种多抗均可与纯化的人血小板GPIbα特异结合,表明人血小板GPIbα 559位点丝氨酸存在磷酸化与非磷酸化两种状态.结论 应用人工合成多肽成功制备出2种可特异性识别丝氨酸磷酸化状态的兔抗人血小板GPIbα胞内段多肽多抗,并证明人血小板GPIbαC端559位丝氨酸存在磷酸化状态.
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| 关 键 词： | 血小板 血小板糖蛋白GPIb-IX复合物 磷酸丝氨酸 抗体 |
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