壮腰通络方含药血清对TNF-α介导的髓核细胞焦亡恶性循环的影响 |
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引用本文: | 冯蓬,高春雨,孙凯,朱立国,高景华,李路广,李建国,车颖.壮腰通络方含药血清对TNF-α介导的髓核细胞焦亡恶性循环的影响[J].中医杂志,2023(21):2224-2231. |
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作者姓名: | 冯蓬 高春雨 孙凯 朱立国 高景华 李路广 李建国 车颖 |
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作者单位: | 1. 中国中医科学院望京医院;2. 山东中医药大学 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(82205152); |
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摘 要: | 目的 探讨壮腰通络方延缓腰椎间盘退变的可能机制。方法 利用佛波酯、干扰素γ和脂多糖将THP-1细胞诱导为M1巨噬细胞,与髓核细胞建立Transwell共培养体系。首先以胎牛血清作为对照血清,采用MTT法分析不同体积分数(5%、10%、15%、20%)壮腰通络方大鼠含药血清对M1和髓核细胞活性的影响,筛选后续实验药物浓度。随后建立实验一,分为髓核细胞对照组、M1巨噬细胞对照组、髓核细胞+壮腰方组、髓核细胞+肿瘤坏死因子α (TNF-α)组、髓核细胞+TNF-α+壮腰方组、共培组、共培+壮腰方组,每组3个复孔。利用ELISA法检测各组培养上清白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素18 (IL-18)含量,实时荧光定量PCR检测髓核细胞中IL-1β和IL-18 mRNA表达,细胞免疫荧光法检测髓核细胞中Gasdermin D(GSDMD)蛋白表达。实验二利用TNF-α过表达质粒或TNF-α空载体质粒干预M1巨噬细胞,并在共培养条件下分为共培组、空载体质粒+共培组、空载体质粒共培+壮腰方组、共培+壮腰方组、过表达质粒共培+壮腰方组、过表达质粒+共培组,每组3个复孔。利用实时荧光定量PCR和...
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关 键 词: | 腰椎间盘退变 壮腰通络方 M1巨噬细胞 髓核细胞 细胞焦亡 肿瘤坏死因子α |
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