| pSIREN-survivin/shRNA表达载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 马静,赵留芳,刘流,李晓江,杨洁,孙瑞梅,隋军.pSIREN-survivin/shRNA表达载体的构建与鉴定[J].中国普通外科杂志,2011,20(5):507-511. |
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| 作者姓名： | 马静 赵留芳 刘流 李晓江 杨洁 孙瑞梅 隋军 |
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| 作者单位： | 马静 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； 赵留芳 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； 刘流 (昆明医学院第一附属医院,口腔颌面外科,云南,昆明,650032)； 李晓江 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； 杨洁 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； 孙瑞梅 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； 隋军 (昆明医学院第三附属医院,头颈外科,云南,昆明,650118)； |
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| 摘 要： | 目的：构建pSIREN-survivin/shRNA重组质粒并鉴定, 为探索瘢痕疙瘩基因治疗的RNA干扰（RNAi）途径奠定基础。
方法：根据基因库survivin cDNA序列及Reynolds设计原则, 设计并合成两端有酶切位点的65个碱基的寡核苷酸链, 退火成互补双链后用T4DNA酶克隆至线性化的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中; 转化大肠杆菌DH-5a菌株, 提取质粒行酶切鉴定, 测序分析。
结果：PCR扩增片断出现465 bp大小的目的基因条带与预期结果相符; 双酶切见约65 bp目的基因条带; 插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致。
结论：成功构建重组质粒pSIREN-survivin/shRNA, 为下一步用脂质体转染瘢痕或肿瘤细胞的研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 瘢痕疙瘩 RNA干扰 质粒 Survivin 短发卡RNA |
| 收稿时间： | 2010/10/12 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2011/4/16 0:00:00 |
Construction and identification of survivin-shRNA expression vector |
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| Institution: | (1.Department of Head and Neck, the Third Affiliated Hospital, Kunming Medical College, Kunming 650118, China| 2.Department of Oral and Maxillofacial Surgery, the First Affiliated Hospital, Kunming Medical College, Kunming 650032, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keloid RNA Interference Plasmids Survivin shRNA |
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