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SARS病毒N蛋白特异性单链抗体的筛选
引用本文:赵爱志,杨宇,袁振华,董小岩,连忠辉,崔莲仙,吴小兵,何维. SARS病毒N蛋白特异性单链抗体的筛选[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2005, 25(8): 630-633
作者姓名:赵爱志  杨宇  袁振华  董小岩  连忠辉  崔莲仙  吴小兵  何维
作者单位:1. 100005,北京,中国医学科学院基础医学研究所免疫室;本元正阳基因技术股份有限公司
2. 本元正阳基因技术股份有限公司;中国疾病控制中心病毒病预防控制所
3. 本元正阳基因技术股份有限公司
4. 100005,北京,中国医学科学院基础医学研究所免疫室
基金项目:基金项目:国家自然科学基金资助(C0302050102)
摘    要:目的 利用大容量人源性SARS单链抗体库筛选N蛋白的特异性单链抗体。方法利用RT-PCR的方法克隆了SARS病毒的N蛋白基因,克隆入原核表达载体pBV220,在大肠杆菌DH5a中进行表达并经离子交换色谱纯化后得到了纯度达95%以上的N蛋白,然后以此蛋白包被25cm^2组织培养瓶,对SARS单链抗体库进行先松弛,后严谨的筛选、富集,进行4轮筛选后对所筛的抗体进行ELISA鉴定。结果经过4轮的筛选、富集,得到了1株高亲和力的N蛋白单链抗体N18。结论在对SAILS疾病的早期检测或筛查、SARS病毒的生活周期及发病机理的研究中N18将起到重要的作用。

关 键 词:SARS冠状病毒 N蛋白 单链抗体库 SARS病毒 N蛋白基因 库筛选 异性 RT-PCR pBV220 原核表达载体
收稿时间:2004-11-04
修稿时间:2004-11-04

Isolation of the scFv to N protein of SARS virus from library
ZHAO Ai-zhi,YANG Yu,YUAN Zhen-hua,DONG Xiao-yan,LIAN Zhong-hui,CUI Lian-xian,WU Xiao-bing,HE Wei. Isolation of the scFv to N protein of SARS virus from library[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2005, 25(8): 630-633
Authors:ZHAO Ai-zhi  YANG Yu  YUAN Zhen-hua  DONG Xiao-yan  LIAN Zhong-hui  CUI Lian-xian  WU Xiao-bing  HE Wei
Abstract:
Keywords:SARS coronavirus   N protein   scFv
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