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热休克蛋白70-2基因沉默诱导大鼠精原细胞凋亡及其机制
引用本文:马建鸿,李世文,罗仪.热休克蛋白70-2基因沉默诱导大鼠精原细胞凋亡及其机制[J].中华实验外科杂志,2010,27(6).
作者姓名:马建鸿  李世文  罗仪
作者单位:武汉大学中南医院泌尿外科,430071
摘    要:目的 探讨热休克蛋白(HSP)70-2基因沉默对精原细胞的影响及其机制.方法 构建HSP70-2特异的短发夹RNA(shRNA)质粒载体,并转染大鼠精原细胞;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP70-2 mRNA表达,Western blot检测HSP70-2、Cyclin DI、bcl-2和box蛋白表达,应用流式细胞术分析细胞周期和凋亡.结果 HSP70-2基因沉默组的HSP70-2蛋白表达量为0.93±0.13,明显低于阴性对照组1.31±0.10(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,与转染Scrambled的阴性对照组比较,转染pGenesil-1-HSP70-2重组质粒组的PC3细胞在G1期出现明显细胞周期阻滞和细胞凋亡,G1期阻滞细胞比例为(80.09±2.37)%,凋亡率为(7.44±2.41)%,而阴性对照组分别为(61.85±2.31)%和(1.09±0.57)%(P<0.05).与阴性对照组比较,转染后细胞bcl-2、Cyclin D1表达水平显著降低,而bax表达水平升高.结论 HSP70-2基因沉默能诱导精原细胞凋亡,其机制可能是通过Cyclin D1蛋白调节细胞周期并通过上调box蛋白表达促进细胞凋亡.

关 键 词:热休克蛋白70  精原细胞  RNA干扰  脱噬作用

Heat shock protein 70-2 gene silence by shRNA induced apoptosis of rat spermiogonium cells and its mechanism
MA Jian-kong,LI Shi-wen,LUO Yi.Heat shock protein 70-2 gene silence by shRNA induced apoptosis of rat spermiogonium cells and its mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2010,27(6).
Authors:MA Jian-kong  LI Shi-wen  LUO Yi
Abstract:
Keywords:HSP70  Spermiogonium  siRNA  Apoptosis
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