| miR-1247-5p对Smad2基因的靶向调控作用 |
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| 引用本文： | 张议心,王利新,徐广贤,杨丽,赵瑾,郭文伟,刘新兰.miR-1247-5p对Smad2基因的靶向调控作用[J].基础医学与临床,2016(4):445-450. |
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| 作者姓名： | 张议心 王利新 徐广贤 杨丽 赵瑾 郭文伟 刘新兰 |
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| 作者单位： | 1. 宁夏医科大学检验学院,宁夏银川750004;西安市中心血站,陕西西安710000;2. 宁夏医科大学总医院,宁夏银川,750004;3. 宁夏医科大学检验学院,宁夏银川,750004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81460368)，宁夏科技支撑项目(宁科计字(2013)20号)，宁夏自然科学基金(NZ-13149) |
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| 摘 要： | 目的利用miR-1247-5p过表达模拟物mimics,研究miR-1247-5p对TGF-β信号通路中关键蛋白Smad2的靶向调控作用。方法合成模拟miR-1247-5p过表达的模拟物mimics,及抑制miR-1247-5p表达的抑制物inhibitors;同时构建与miR-1247-5p互补靶基因Smad2的3'非翻译区,将其克隆到线性化的Report荧光报告载体中。将测序鉴定阳性的report-Smad2 3'-UTR重组质粒,与miR-1247-5p的mimics/inhibitors共转染至HEK-293T细胞,通过relative luciferase activity实验验证靶向关系,并通过Western blot实验进一步检测Smad2蛋白表达水平。结果成功构建report-Smad2 3'-UTR重组质粒,Western blot实验表明转染miR-1247-5p mimics组中Smad2蛋白表达下调(P0.05);而转染miR-1247-5p inhibitors组中,Smad2蛋白表达上调(P0.05)。结论证实miR-1247-5p直接靶向TGF-β信号通路中关键蛋白Smad2的表达,在蛋白水平对其进行调控,为进一步研究miRNA在细胞通路中的调控作用提供了依据。
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| 关 键 词： | miR-1247-5p TGF-β信号通路 Smad2基因 肿瘤 |
Targets regulation of Samd2 gene expression by miR-1247-5p |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-1247-5p TGF-β signaling pathway Smad2 gene tumour |
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