黄芪甲苷调控p62-Nrf2通路对抗小鼠淋巴细胞白血病耐药株的机制研究

[目的] 基于p62-核因子红细胞样2相关因子2（Nrf2）通路探讨黄芪甲苷（AST Ⅳ）对抗小鼠淋巴细胞白血病耐药株的机制。[方法] 复制白血病细胞耐药模型，将细胞分为6组，即空白组（blank）、模型组（model）、黄芪甲苷组（AST Ⅳ）、盐酸维拉帕米（VER）、Nrf2通路抑制剂（ML385）组及抑制剂与黄芪甲苷组（ML385+AST Ⅳ），药物干预48 h。细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测耐药细胞对顺铂的敏感性，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）变化，明确AST Ⅳ对耐药细胞的影响；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率变化，荧光实时定量聚合酶链式反应（Real time PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）检测p62-Nrf2通路p62、Nrf2、血红素氧化酶-1（HO-1）、B淋巴细胞瘤-2基因（bcl-2）、bcl-2相关蛋白X（bax）及半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）等表达变化明析AST Ⅳ对耐药细胞的作用机制。[结果] AST Ⅳ通过下调p62-Nrf2通路节点基因p62、HO-1、bcl-2/bax，上调Caspase-3的表达量，降低耐药细胞ROS水平，增加其对顺铂敏感性，使其增殖受抑，细胞周期呈现DNA合成期（S）、合成后期（G2）/有丝分裂期（M）阻滞，凋亡率升高。[结论] AST Ⅳ具有逆转白血病耐药的功效，可能与p62-Nrf2通路调控相关，但细胞最终命运受多条通路共同调控仍需探讨。