| 大鼠IP-10-PE38 KDEL重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 孙岚,祁志荣,张琴,林媛,李明远,张林,蒋忠华,李虹. 大鼠IP-10-PE38 KDEL重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达[J]. 免疫学杂志, 2007, 23(5): 482-485 |
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| 作者姓名： | 孙岚 祁志荣 张琴 林媛 李明远 张林 蒋忠华 李虹 |
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| 作者单位： | 四川大学,基础医学与法医学院微生物学教研室,成都,610041;四川大学,华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) , 国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建大鼠干扰素诱导蛋白10(rIP-10)基因和铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)基因的真核融合表达载体,并研究其在NIH 3T3细胞中的表达情况.方法通过PCR获得本实验需要的rIP-10基因片段,通过酶切原核表达载体PTKL459K-IL-4-PT38KDEL获得铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38KDEL基因,再通过适当的酶切及连接反应,构建rIP-10与PE38KDEL融合基因的真核表达载体pcDNA3.1( )-rIP-10-PE38KDEL.重组质粒经限制性性内切酶,PCR及DNA序列测定证实构建成功后,用PolyFect脂质体转染NIH 3T3细胞,然后用免疫荧光技术检测rIP-10-PE38KDEL融合蛋白在NIH 3T3细胞的表达.结果酶切分析、PCR及DNA序列测定证实,rIP-10-PE38KDEL融合基因被成功克隆人真核表达质粒载体pcDNA3.1( ),免疫荧光技术检测证实重组基因可在NIH 3T3细胞表达.结论 rIP-10-PE38KDEL融合基因可在NIH 3T3细胞中表达,为进一步研究其对自身免疫病的Th1细胞靶向毒性及临床应用奠定基础.
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| 关 键 词： | rIP-10 PE38KDEL 重组免疫毒素 NIH 3T3细胞 真核表达 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）05-0482-04 |
| 修稿时间： | 2007-04-252007-07-15 |
Construction of eukaryotic expression vector of recombinant immunotoxin rat IP-10-PF38KDEL and its expression in NIH 3T3 cells |
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| SUN Lan,QI Zhi-rong,ZHANG Qin,LIN Yuan,LI Ming-yuan,ZHANG Lin,JIANG Zhong-hua,LI Hong. Construction of eukaryotic expression vector of recombinant immunotoxin rat IP-10-PF38KDEL and its expression in NIH 3T3 cells[J]. Immunological Journal, 2007, 23(5): 482-485 |
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| Authors: | SUN Lan QI Zhi-rong ZHANG Qin LIN Yuan LI Ming-yuan ZHANG Lin JIANG Zhong-hua LI Hong |
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| Affiliation: | Department of Microbiology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu 610041, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rIP-10 PE38KDEL Recombinant immunotoxin NIH 3T3 cell Eukaryotic expression |
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