钴金属螯合亲和层析在hIGF-1融合蛋白分离纯化中的应用 |
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引用本文: | 杨渐,俞昌喜,许盈,廖联明.钴金属螯合亲和层析在hIGF-1融合蛋白分离纯化中的应用[J].药物生物技术,2013(3):220-224. |
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作者姓名: | 杨渐 俞昌喜 许盈 廖联明 |
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作者单位: | 福建医科大学药学院药理学系 |
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基金项目: | 福建省高校产学合作科技重大项目(No.2010Y4002) |
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摘 要: | 为探讨钴金属螯合亲和层析应用于分离纯化制备人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的可行性与纯化条件,以重组工程菌E.coli DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,使用钴亲和层析技术分离纯化其表达产物并与镍亲和层析比较,在此基础上尝试应用钴亲和层析分离纯化制备较大量的hIGF-1融合蛋白。结果显示,钴亲和层析在分离纯化hIGF-1融合蛋白时表现出更好的可操作性与纯化效果,线性放大条件后分离纯化效果稳定,制备hIGF-1融合蛋白产物纯度约为95%,蛋白获得率约为10.78%。研究初步建立了切实可行的钴金属螯合亲和层析分离纯化制备hIGF-1融合蛋白的工艺。
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关 键 词: | 人胰岛素样生长因子-1 金属螯和亲和层析 固相化金属离子亲和层析 六聚组氨酸 纯化 镍离子 钴离子 |
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