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重组BMP7腺病毒的构建及转染骨髓基质干细胞后的表达
引用本文:祝联,刘伟,刘德莉,吴娟娟,王丹茹,崔磊,曹谊林. 重组BMP7腺病毒的构建及转染骨髓基质干细胞后的表达[J]. 中国生物医学工程学报, 2005, 24(2): 245-253
作者姓名:祝联  刘伟  刘德莉  吴娟娟  王丹茹  崔磊  曹谊林
作者单位:上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科,上海市组织工程研究中心,上海,200011
基金项目:国家“973”组织工程基本科学问题资助项目 (G19990 5 43 0 4),国家“863”组织工程化骨构建技术与产品开发资助项目 (2 0 0 2AA2 0 5 11)。
摘    要:根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程,原核表达载体pBlue-BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切,重组成BMP7的腺病毒载体,并转染293细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno-BMP7经限制性内切酶PI-SeeⅠ和Ⅰ-CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段,PCR扩增得到特异的扩增片段,表明重组的Adeno-BMP7载体构建成功,其中携带有目的基因BMP7cDNA片段。Adeno-Lac-Z的体外转染骨髓基质干细胞(BMSCs),染色表明转染率可达90%以上;RT-PCR、免疫组化证明Adeno-BMP7转染BMSCs后BMP7在基因和蛋白水平上均有表达;转染Adeno-BMP7后的BMSCs细胞悬液裸鼠肌肉内注射后,X光片和组织学观察都表明BMP7转染可明显促进新骨的形成,与没转染Adeno-BMP7的BMSCs有显著差异。

关 键 词:重组腺病毒 骨髓基质干细胞 骨形成蛋白7
文章编号:0258-8021(2005)02-0245-09
修稿时间:2003-05-23

Construction of BMP7 Adenovirus and Expression of BMP7 in Transfected BMSCs
ZHU Lian,LIU Wei,LIU De-li,WU Juan-juan,WANG Dan-Ru,CUI Lei,CAO Yi-lin. Construction of BMP7 Adenovirus and Expression of BMP7 in Transfected BMSCs[J]. Chinese Journal of Biomedical Engineering, 2005, 24(2): 245-253
Authors:ZHU Lian  LIU Wei  LIU De-li  WU Juan-juan  WANG Dan-Ru  CUI Lei  CAO Yi-lin
Abstract:
Keywords:recombined adenovirus  bone marrow stromal cells  bone morphogenetic protein 7
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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