香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究

目的：探讨香菇多糖（Lentinan,LNT）联合丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法：将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒（100μg/只）,采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,与NS3抗原多肽共育作为效应细胞。另培养NS3抗原致敏的P815细胞作为靶细胞。采用MTT法分别检测NS3抗原特异性T细胞增殖反应和细胞毒T细胞特异性杀伤反应（CTL）。同时采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平。结果：研究发现高剂量及中剂量香菇多糖与NS3质粒联合在效靶细胞比为50：1时,可明显加强NS3抗原特异性CTL反应,与单用NS3质粒相比有显著差异（P〈0.01和P〈0.05）;中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用明显增强NS3抗原特异性T细胞增殖反应（均为P〈0.01）;细胞因子分析显示中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用使IFN-γ分泌增加（均为P〈0.01）。结论：采用初次加强免疫法将中剂量香菇多糖（0.1ml/10g）与HCVNS3质粒联合免疫BALB/c小鼠,可激发明显增强的抗原特异性T细胞增殖和CTL反应,并伴有大量的IFN-γ分泌,提示香菇多糖可作为丙肝病毒NS3核酸疫苗的免疫佐剂,加强抗原特异性免疫应答效应。

Antigen-specific immunity generated by lentinan plus HCV NS3 DNA vaccine