外周血干细胞与组织工程骨复合移植修复犬牙周骨缺损过程中转化生长因子β的表达*

背景：外周血干细胞是一类具有多分化潜能的前体细胞,有分化为成骨的潜能,组织工程骨作为细胞移植的载体,与受体组织和种子细胞有良好的相容性。转化生长因子β是骨缺损修复的重要调节因子，有诱导外周血干细胞分化增殖为成骨细胞的作用。 目的：观察外周血干细胞与组织工程骨复合移植修复牙周骨缺损中转化生长因子β的表达。 设计：以细胞为对象的观察实验。 单位：西安交通大学口腔医院。 材料：实验于2003/2006年在西安交通大学口腔医院完成。实验动物由西安交通大学医学院（原西安医科大学）动物试验中心提供。实验动物均采用氯胺酮肌肉诱导后,肌内注射速眠新麻醉后进行手术或处死取材，对动物处置符合动物伦理学标准。 方法：抽取犬外周血干细胞，制成细胞悬液备用。取健康仔猪髂骨制作脱钙脱蛋白生物组织工程骨,浸入犬外周血干细胞细胞悬液中备用。将10 只健康杂种犬分成实验组和对照组,每组5 只。自犬下颌左右侧尖牙之间沿唇侧牙龈沟处达牙槽嵴,再转向双侧前庭沟切开,形成一个梯形瓣，向下翻瓣暴露唇侧骨板，在下颌侧切牙之间用涡轮钻制备 2 cm×2 cm×1 cm 的骨缺损区,实验组植入外周血干细胞-组织工程骨，对照组不移植外周血干细胞,仅移植组织工程骨。术后2，3，4，8，12周采用免疫组织化学方法观察外周血干细胞分化增殖成为成骨细胞过程中转化生长因子β的表达。 主要观察指标：①光镜和透射电镜观察外周血干细胞转化成为成骨细胞的形态学变化和细胞器的结构功能。②免疫组织化学方法测量外周血干细胞在转化成为成骨细胞的过程中转化生长因子β的表达。 结果：实验组在外周血干细胞-组织工程骨移植后2 周,即见骨缺损区边缘转化生长因子β呈弱阳性表达,4~8 周骨缺损区中心区域可见大量的成骨细胞、成纤维细胞和胶原纤维呈现强阳性表达,12 周骨缺损区已完全修复。对照组组织工程骨移植后8~12 周,仅在骨缺损边缘区域呈转化生长因子β弱阳性表达。 结论：当用外周血干细胞和组织工程修复犬牙周骨缺损时，转化生长因子β能诱导外周血干细胞分化和增殖为成骨细胞。

Transforming growth factor-beta expression in repairing dog alveolar bone defect during synergetic transplantation of peripheral blood stem cells and tissue engineered bone*