霉酚酸酯抑制转化生长因子-β在肺成纤维细胞中的表达及应用价值

目的 探讨霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)抑制转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)在肺成纤维细胞WI26中的表达和应用价值.方法 肺成纤维细胞WI26常规细胞培养后分4组:对照组、MMF组、TGF-β组、MMF+TGF-β组.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 检测TGF-β介导相关基因COL1A1的表达,Western blot和氯霉素乙酰基转移酶实验(chloramphenicol acetyl transferase,CAT)方法检测COL1蛋白的表达;胶原基质收缩实验和细胞伤痕实验观察胶原纤维的收缩和细胞移行能力的差异.结果 MMF作用细胞24、48 h后,COL1A1 mRNA表达分别为对照组的(77.0±2.9)% 和(38.0±3.7)%,MMF降低了COL1A1 mRNA水平(P<0.05);TGF-β作用细胞24、48 h后,COL1A1 mRNA表达分别为对照组的(134.0±3.1)%和(189.0±2.4)%,TGF-β提高了COL1A1 mRNA水平(P<0.05);MMF+TGF-β作用细胞24,48 h 后,COL1A1 mRNA表达分别为对照组的(95.0±2.7)%和(71.0±3.3)%(P<0.05),48 h后MMF阻止了TGF-β诱导的COL1A1 mRNA表达.48 h后MMF组COL1蛋白表达为对照组的(44.0±1.9)%(P<0.05);TGF-β组COL1蛋白表达为对照组的(145.0±1.5)%(P<0.05);MMF+TGF-β组COL1蛋白表达为对照组的(79.0±2.5)%,MMF阻止TGF-β诱导的COL1蛋白表达.胶原基质收缩实验(第0、1、5天观察)和细胞伤痕实验(第0、8、24小时观察)结果显示:MMF重建成纤维细胞的接触抑制生长.结论 MMF能阻止TGF-β介导的细胞纤维化.