| 重组人白细胞介素15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达 |
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| 引用本文： | 孙汭,田志刚,魏海明,刘杰,张捷,冯进波. 重组人白细胞介素15表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达[J]. 中国生化药物杂志, 2000, 21(4): 163-165 |
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| 作者姓名： | 孙汭 田志刚 魏海明 刘杰 张捷 冯进波 |
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| 作者单位： | 山东省医学科学院基础医学研究所山东肿瘤生物治疗研究中心,济南,250062 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金资助!(项目编号 :Y95C0 4 2 6) |
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| 摘 要： | 目的 :获得重组人白细胞介素 1 5 (rhIL 1 5 )高效表达菌株。方法 :经细菌脂多糖 +γ干扰素活化的人外周血单个核细胞提取细胞总RNA ,用RT PCR方法扩增出编码人IL 1 5cDNA的基因片段 ,采用 pBV2 2 0表达载体 ,经DNA重组技术构建IL 1 5基因工程菌。结果 :核酸序列测定与预期一致 ,所表达的IL 1 5经SDS PAGE证明分子量约 1 5kD ,表达量占菌体总蛋白的 2 8% ,经CTLl2 细胞检测 ,表达产物粗提物 1∶1 0 0复性后效价可达到1 0 6IU /ml。结论 :构建的基因工程菌为IL 1 5高效表达菌株。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素15 高效表达 DNA重组 |
| 修稿时间： | 1999-08-16 |
Construction of Recombinant Human Interleukin-15 Expression Vector and Its High Level Expression in E.coli |
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| Sun Rui,Tian Zhigang,Wei Haiming,Liu Jie,Zhang Jie,Feng Jinbo. Construction of Recombinant Human Interleukin-15 Expression Vector and Its High Level Expression in E.coli[J]. Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics, 2000, 21(4): 163-165 |
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| Authors: | Sun Rui Tian Zhigang Wei Haiming Liu Jie Zhang Jie Feng Jinbo |
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| Abstract: | Purpose:To obtain human IL 15 high level expression vector.Methods:Human IL 15 cDNA fragments (0.35 kb)were amplified from LPS+IFNγ stimulated human monocytes by RT PCR method and inserted into EcoR I/BamH I site of pBV220 expression vector which contains P RP L promoters and SD sequence.Results:The expression level of rhIL 15 was more than 28% of the total bacterial protein in SDS PAGE,molecular weight was 14.4 kD.The biological activity of refolded bacterial extract(1∶100)was 10 6 IU/ml tested by using CTLl 2 cell line.Conclusion:Recombinant human IL 15 high level expression vector has been constructed in E.coli . |
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| Keywords: | Human interleukin-15 High level expression DNA recombination |
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