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| 多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应-通用基因芯片检测食源性致病菌方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.西安市疾病预防控制中心 |
| 摘 要： | 目的建立一种基于多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应(MOL-PCR)的食源性致病菌通用基因芯片检测方法。方法针对细菌性食物中毒8种常见致病菌,在各自特异性引物之间设计一对首尾相接的上、下游检测探针。采用多重PCR富集靶序列并作为模板,通过多重连接酶检测反应及通用不对称PCR标记,获得大量含标签互补序列(Anti-tag)的荧光标记单链产物,可与芯片上固定的标签序列(Tag)进行杂交检测。结果该方法能特异性地鉴别单一和多重目标菌感染。纯培养物的检测灵敏度为(1.1~8.5)×10~2CFU/mL。对96份食物中毒和临床腹泻样本检测,芯片结果与常规分离与生化鉴定及荧光定量PCR结果一致。结论该方法为快速、准确、灵敏、高通量地鉴定食源性疾病的病原菌提供了一种新型检测平台。 |
| 关 键 词： | 食源性致病菌 多重寡核苷酸连接-聚合酶链式反应 通用基因芯片 |
Development of multiplex oligonucleotide ligation-PCR-universal DNA microarrays for detection of foodborne pathogens |
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| Abstract: | |
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